197341 Санкт- Петербург, ул. Аккуратова, 2
2, Akkuratov St., Saint Petersburg 197341
197341 Санкт- Петербург, ул. Аккуратова, 2;
197101 Санкт- Петербург, ул. Мира, 14
2, Akkuratov St., Saint Petersburg 197341;
2 14 Mir St., Saint Petersburg 197101
197341 Санкт- Петербург, ул. Аккуратова, 2
2, Akkuratov St., Saint Petersburg 197341
197101 Санкт- Петербург, ул. Мира, 14
2 14 Mir St., Saint Petersburg 197101
197341 Санкт- Петербург, ул. Аккуратова, 2
2, Akkuratov St., Saint Petersburg 197341
197341 Санкт- Петербург, ул. Аккуратова, 2
2, Akkuratov St., Saint Petersburg 197341
197341 Санкт- Петербург, ул. Аккуратова, 2;
197101 Санкт- Петербург, ул. Мира, 14
2, Akkuratov St., Saint Petersburg 197341;
2 14 Mir St., Saint Petersburg 197101
Проблема ранней диагностики ревматоидного артрита (РА) сохраняет свою актуальность, что связано с ограниченным потенциалом доступных биомаркеров и гетерогенностью заболевания. Хемокины и цитокины, продуцируемые синовиальной оболочкой больных, играют ведущую роль в патогенезе заболевания, что предполагает возможность их использования в качестве перспективных биомаркеров.
Цель исследования – сравнительное изучение относительной экспрессии мРНК гомеостатических хемокинов: фактора, продуцируемого стромальными клетками 1 (CXCL12/ФПСК1), хемоаттрактанта В-клеток (CXCL13/ХБК1), их рецепторов CХCR4 и CХCR5, провоспалительных хемокинов: макрофагального хемотаксического белка 1 (CCL2/МХБ1), хемокина, экспрессируемого и секретируемого T-клетками при активации (CCL5/RANTES), интерлейкина (ИЛ) 8 (CXCL8/ИЛ8), ИЛ17 и сосудисто-эндотелиального фактора роста (СЭФР) в биоптатах синовиальной оболочки больных РА, остеоартрозом (ОА) и здоровых лиц, оценка диагностической информативности данных биомаркеров.
Материал и методы. Экспрессию мРНК оценивали методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени. Группа РА включала 28 больных, медиана возраста – 47 [35; 54] лет, длительности заболевания – 8 [4; 12] лет, значение индекса DAS28 – 4,9 [3,9; 5,5], 16 больных были серопозитивны по ревматоидному фактору, 14 – по антителам к циклическому цитруллинированному пептиду. В группу ОА вошли 22 пациента с медианой возраста 70,5 [61; 74] года. Обследованы также 15 клинически здоровых лиц с медианой возраста 45 [28; 64] лет.
Результаты и обсуждение. У больных РА отмечалось значимое повышение уровней мРНК RANTES, ИЛ8 и ИЛ17, СЭФР, ХБК1 и CXCR5 в сравнении с группами больных ОА и здоровых лиц. У больных ОА уровень гомеостатических хемокинов ХБК1 и ФПСК1, обладающих В-клеточной хемоаттрактивной активностью, значимо превысил таковой в контрольной группе, что может указывать на их участие в патогенезе заболевания. Наиболее информативным в диагностике РА оказалось определение мРНК RANTES: площадь под кривой (ППК) – 0,91 [95% доверительный интервал (ДИ) 0,84–0,99], диагностическая чувствительность – 72,97% (95% ДИ 55,88–86,21%), диагностическая специфичность – 96,15% (95% ДИ 80,36–99,90%), отношение правдоподобия положительного результата (ОППР) – 18,95, отношение правдоподобия отрицательного результата (ОПОР) – 0,28 при диагностическом пороге 0,0350, а также мРНК ХБК1. Значение ППК ХБК1 составило 0,78 (95% ДИ 0,66–0,89), диагностическая чувствительность – 56,25% (95% ДИ 37,66–73,64%), диагностическая специфичность – 92,59% (95% ДИ 75,71–99,09%), ОППР – 7,59, ОПОР – 0,47 при диагностическом пороге 0,0184.
The problem of the early diagnosis of rheumatoid arthritis (RA) remains relevant, which is associated with the limited potential of available biomarkers and the heterogeneity of the disease. Chemokines and cytokines produced by the synovial membrane of the patients play a leading role in the pathogenesis of the disease, suggesting that they may be used as promising biomarkers.
Objective: to comparatively investigate the relative mRNA expression of the homeostatic chemokines: stromal cellderived factor 1 (SDF-1/CXCL12), B-cell-attracting chemokine-1 (BCA-1/CXCL13), their receptors CXCR4 and CXCR5, the proinflammatory chemokines: macrophage chemotactic protein-1 (MCP-1/CCL2), T cell expressed and secreted chemokine on activation (CCL5/RANTES), interleukin-8 (IL-8) (IL-8/CXCL8), IL-17, and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the synovial membrane biopsy specimens from patients with RA or osteoarthritis (OA) and from healthy individuals and to estimate the diagnostic informative value of these biomarkers.
Subjects and methods. The expression of mRNA was estimated using a real-time polymerase chain reaction assay. The RA group included 28 patients, their median age was 47 [35; 54] years; disease duration – 8 [4; 12] years; DAS28 – 4.9 [3.9; 5.5]; 16 and 14 patients were seropositive for rheumatoid factor and anti-cyclic citrulinated peptide antibodies, respectively. The OA group comprised 22 patients whose median age was 70.5 [61; 74] years. Fifteen clinically healthy individuals with a median age of 45 [28; 64] years were also examined.
Results and discussion. The RA group was noted to have significantly higher RANTES, IL-8, IL-17, VEGF, BCA-1, and CXCR5 mRNA levels than the OA group and healthy individuals. In the patients with OA, the level of the homeostatic chemokines BCA-1 and SDF-1, which had B-cell chemoattractant activities, was higher than that in the control group, which may suggest that they are implicated in the pathogenesis of the disease. The determination of RANTES mRNA expression was most informative in diagnosing RA: the area under the curve (AUC), 0.91 [95% confidence interval (CI), 0.84–0.99]; diagnostic sensitivity, 72.97% (95% CI, 55.88–86.21), diagnostic specificity, 96.15% (95% CI, 80.36–99.90); positive likelihood ratio (LR+), 18.95; negative likelihood ratio (LR-), 0.28 at a diagnostic threshold of 0.0350, so was CBC1 mRNA. The AUC for BCA-1 was 0.78 (95% CI, 0.66–0.89); diagnostic sensitivity, 56.25% (95% CI, 37.66–73.64), diagnostic specificity, 92.59% (95% CI, 75.71–99.09); LR+, 7.59; LR-, 0.47 at a diagnostic threshold of 0.0184.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.