rspНаучно-практическая ревматологияRheumatology Science and Practice1995-44841995-4492IMA-PRESS, LLC10.14412/1995-4484-2017-500-503rsp-2431Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL RESEARCHГенетический полиморфизм и цитогенетические изменения Т-лимфоцитов периферической крови у больных артритом, ассоциированным с иксодовым клещевым боррелиозом, в северных регионах СибириGENETIC POLYMORPHISM AND CYTOGENETIC CHANGES IN THE PERIPHERAL BLOOD T-LYMPHOCYTES OF PATIENTS WITH ARTHRITIS ASSOCIATED WITH IXODES TICK-BORNE BORRELIOSIS IN THE NORTHERN REGIONS OF SIBERIAИльинскихН. Н.IlyinskikhN. N.

634050 Томск, Московский тракт, 2

634050 Томск, пр. Ленина, 36

634061 Томск, ул. Киевская, 60

2, Moskovsky Road, Tomsk 634050

36, Lenin Prospect, Tomsk 634050

60, Kievskaya St., Tomsk 634061

nauka-tomsk@yandex.ruИльинскихЕ. Н.IlyinskikhE. N.

634050 Томск, Московский тракт, 2

634050 Томск, пр. Ленина, 36

2, Moskovsky Road, Tomsk 634050

36, Lenin Prospect, Tomsk 634050

ЗуевскийВ. П.ZuevskyV. P.

628011 Ханты-Мансийск, ул. Мира, 40

40, Mir St., Khanty-Mansiysk 628011

СеменовА. Г.SemenovA. G.

634050 Томск, Московский тракт, 2

2, Moskovsky Road, Tomsk 634050

ФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский Томский государственный университет» Минобрнауки России ФГБОУ ВО «Томский государственный педагогический университет» Минобрнауки РоссииРоссияSiberian State Medical University, Ministry of Health of Russia National Research Tomsk State University, Ministry of Education and Science of Russia Tomsk State Pedagogical University, Ministry of Education and Science of RussiaRussian FederationФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава России ФГАОУ ВО «Национальный исследовательский Томский государственный университет» Минобрнауки РоссииРоссияSiberian State Medical University, Ministry of Health of Russia National Research Tomsk State University, Ministry of Education and Science of RussiaRussian FederationБУ ВО ХМАО – Югры «Ханты-Мансийская государственная медицинская академия» Минобрнауки РоссииРоссияKhanty-Mansi State Medical Academy, Ministry of Education and Science of Russia, Khanty- Mansi Autonomous District-YugrRussian FederationФГБОУ ВО «Сибирский государственный медицинский университет» Минздрава РоссииРоссияSiberian State Medical University, Ministry of Health of RussiaRussian Federation201727102017555500503Copyright © Ильинских Н.Н., Ильинских Е.Н., Зуевский В.П., Семенов А.Г., 20172017Ильинских Н.Н., Ильинских Е.Н., Зуевский В.П., Семенов А.Г.Ilyinskikh N.N., Ilyinskikh E.N., Zuevsky V.P., Semenov A.G.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://rsp.mediar-press.net/rsp/article/view/2431

Ранее нами были проведены исследования, которые продемонстрировали повышенный уровень цитогенетических нарушений у больных иксодовым клещевым боррелиозом (ИКБ). Установлено также, что тяжесть клинического течения артрита, ассоциированного с ИКБ (АИКБ), зависит от наличия у больного определенных аллелей гена HLA-DRB1.

Цель настоящей работы заключалась в том, чтобы оценить связь между полиморфизмом гена HLA-DRB1 и цитогенетическими изменениями в Т-лимфоцитах периферической крови у больных АИКБ.

Материал и методы

Материал и методы. Проведено обследование 146 больных АИКБ, 100 клинически здоровых реконвалесцентов ИКБ (РИКБ), а также контрольной группы, состоящей из 98 здоровых доноров (ЗД) крови, не болевших в прошлом клещевыми инфекциями, с применением цитогенетических (микроядерный анализ цитокинезблокированных Т-лимфоцитов периферической крови) и молекулярно-генетических (ПЦР-анализ полиморфизма гена HLA-DRB1) методов.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. Частота цитокинез-блокированных лимфоцитов с микроядрами у больных АИКБ была существенно выше, чем аналогичный показатель в группах РИКБ и ЗД (p<0,01), за исключением результатов, полученных в подгруппе больных АИКБ, имеющих аллель DRB1*10 (p>0,05). Наиболее высокие уровни лимфоцитов с микроядрами были у больных АИКБ с аллелью DRB1*17(03), а также *01, *04 по сравнению с соответствующими частотами в группах РИКБ и ЗД (p<0,001). В группе РИКБ наиболее значимое повышение частоты обнаружения лимфоцитов с микроядрами наблюдалось у лиц, имеющих аллели DRB1*01, DRB1*04 или *17(03). Вместе с тем нами не было выявлено никаких достоверных различий по числу лимфоцитов с микроядрами в группе ЗД в зависимости от аллелей гена HLA-DRB1 (p>0,05). Таким образом, было установлено, что больные АИКБ имели наиболее высокую частоту цитогенетических нарушений, за исключением лиц с аллелью DRB1*10.

The authors have previously conducted studies that demonstrate the increased level of cytogenetic disturbances in patients with Ixodes tick-borne borreliosis (ITB). The severity of arthritis associated with ITB (AITB) is also ascertained to depend on whether the patient has certain HLA-DRB1 alleles.

Objective

Objective: to assess the association between HLA-DRB1 gene polymorphism and cytogenetic changes in the peripheral blood T lymphocytes of patients with AITB.

Subjects and methods

Subjects and methods. 146 patients with AITB, 100 clinically healthy convalescents with ITB (CITB), and a control group of 98 healthy blood donors (HBDs) without a history of tick-borne infections were examined using cytogenetic (micronucleus analysis of cytokinesis-blocked peripheral blood T lymphocytes) and molecular genetic (PCR analysis of HLA-DRB1 gene polymorphism) methods.

Results and discussion

Results and discussion. The frequency of cytokinesis-blocked lymphocytes with micronuclei in the AITB group was significantly higher than that in the CITB and HBD groups (p<0.01) with the exception of the results obtained in the subgroup of patients with AITB who had the DRB1*10 allele (p>0.05). The highest levels of lymphocytes with micronuclei were observed in AITB patients with the DRB1*17(03), *01, and *04 alleles as compared to those in the CITB and HBD groups (p<0.001). The CITB group showed the most significant increase in the detection rate of lymphocytes with micronuclei in people with the DRB1*01, DRB1*04, or *17(03) alleles. At the same time, there were no significant differences in the number of lymphocytes with micronuclei in the HBD group, depending on the HLA-DRB1 gene alleles (p>0.05). Thus, the patients with AITB had the highest frequency of cytogenetic disorders with the exception of individuals with the DRB1*10 allele.

иксодовый клещевой боррелиозHLA-DRB1генетический полиморфизмТ-лимфоцитымикроядерный анализIxodes tick-borne borreliosisHLA-DRB1genetic polymorphismT lymphocytesmicronucleus analysisReferencesIl'inskikh EN, Il'inskikh IN, Semenov AG. Cytogenetics aberrations in peripheral blood mononuclear cells in acute Lyme borreliosis patients. Cytol Genet. 2013;47(1):44-52. doi: 10.3103/S0095452713010027Il'inskikh EN, Il'inskikh IN, Semenov AG. Cytogenetics aberrations in peripheral blood mononuclear cells in acute Lyme borreliosis patients. Cytol Genet. 2013;47(1):44-52. doi: 10.3103/S0095452713010027Steere AC, Klitz W, Drouin EE, et al. Antibiotic-refractory Lyme arthritis is associated with HLA-DR molecules that bind a Borrelia burgdorferi peptide. J Exp Med. 2006;203(4):961-71. doi: 10.1084/jem.20052471Steere AC, Klitz W, Drouin EE, et al. Antibiotic-refractory Lyme arthritis is associated with HLA-DR molecules that bind a Borrelia burgdorferi peptide. J Exp Med. 2006;203(4):961-71. doi: 10.1084/jem.20052471Kovalchuka L, Eglite J, Zalite M, et al. The frequency of HLADR alleles in patients with tick-borne disease from Latvia. Res J Infect Dis. 2014;2(4):216-22. doi: 10.7243/2052-5958-2-4Kovalchuka L, Eglite J, Zalite M, et al. The frequency of HLADR alleles in patients with tick-borne disease from Latvia. Res J Infect Dis. 2014;2(4):216-22. doi: 10.7243/2052-5958-2-4Усольцева ОН, Горяев ЮА, Малов ИВ. Роль Лайм-боррелиоза в структуре ревматических заболеваний в Иркутской области. Научно-практическая ревматология. 2002;40(4):130-6 [Usol'tseva ON, Goryaev YuA, Malov IV. The role of Lyme borreliosis in the structure of rheumatic diseases in the Irkutsk region. Nauchno- Prakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2002;40(4):130-6 (In Russ.)].Усольцева ОН, Горяев ЮА, Малов ИВ. Роль Лайм-боррелиоза в структуре ревматических заболеваний в Иркутской области. Научно-практическая ревматология. 2002;40(4):130-6 [Usol'tseva ON, Goryaev YuA, Malov IV. The role of Lyme borreliosis in the structure of rheumatic diseases in the Irkutsk region. Nauchno- Prakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2002;40(4):130-6 (In Russ.)].Klitz W, Maiers M, Spellman S, et al. New HLA haplotype frequency reference standards: high-resolution and large sample typing of HLA DR-DQ haplotypes in a sample of European Americans. Tissue Antigens. 2003;62(4):296-307. doi: 10.1034/j.1399-0039.2003.00103.xKlitz W, Maiers M, Spellman S, et al. New HLA haplotype frequency reference standards: high-resolution and large sample typing of HLA DR-DQ haplotypes in a sample of European Americans. Tissue Antigens. 2003;62(4):296-307. doi: 10.1034/j.1399-0039.2003.00103.xFenech M. The in vitro micronucleus technique. Mutation Research. 2000;455(1-2):81-95. doi: 10.1016/S0027-5107(00)00065-8Fenech M. The in vitro micronucleus technique. Mutation Research. 2000;455(1-2):81-95. doi: 10.1016/S0027-5107(00)00065-8Ингель ФИ. Перспективы использования микроядерного теста на лимфоцитах крови человека, культивируемых в условиях цитокинетического блока. Часть I. Пролиферация клеток. Экологическая генетика. 2006;3(3):7- 19 [Ingel’ F I. Prospects for using a micronucleus test on human lymphocytes cultured under the cytokinetic block conditions. Part I. Cell proliferation. Ekologicheskaya Genetika. 2006;3(3):7-19 (In Russ.)].Ингель ФИ. Перспективы использования микроядерного теста на лимфоцитах крови человека, культивируемых в условиях цитокинетического блока. Часть I. Пролиферация клеток. Экологическая генетика. 2006;3(3):7- 19 [Ingel’ F I. Prospects for using a micronucleus test on human lymphocytes cultured under the cytokinetic block conditions. Part I. Cell proliferation. Ekologicheskaya Genetika. 2006;3(3):7-19 (In Russ.)].Боровиков ВП, Боровиков ИП. Статистический анализ и обработка данных в среде Windows. Москва: Филинъ; 1997. 608 с. [Borovikov VP, Borovikov IP. Statisticheskii analiz i obrabotka dannykh v srede Windows [Statistical analysis and data processing in the Windows environment]. Moscow: Filin; 1997. 608 p.].Боровиков ВП, Боровиков ИП. Статистический анализ и обработка данных в среде Windows. Москва: Филинъ; 1997. 608 с. [Borovikov VP, Borovikov IP. Statisticheskii analiz i obrabotka dannykh v srede Windows [Statistical analysis and data processing in the Windows environment]. Moscow: Filin; 1997. 608 p.].Хромова HA, Болдырева МН, Гуськова ИА и др. Изучение особенностей распределения аллелей DRB1 локуса и трехлокусных гаплотипов среди представителей восточнославянских популяций. Медицинская генетика. 2006;5(6):21-5 [Khromova HA, Boldyreva MN, Gus'kova IA, et al. A study of the distribution of the locus DRB1 alleles and triplicate haplotypes among representatives of East Slavic populations. Meditsinskaya Genetika. 2006;5(6):21-5 (In Russ.)].Хромова HA, Болдырева МН, Гуськова ИА и др. Изучение особенностей распределения аллелей DRB1 локуса и трехлокусных гаплотипов среди представителей восточнославянских популяций. Медицинская генетика. 2006;5(6):21-5 [Khromova HA, Boldyreva MN, Gus'kova IA, et al. A study of the distribution of the locus DRB1 alleles and triplicate haplotypes among representatives of East Slavic populations. Meditsinskaya Genetika. 2006;5(6):21-5 (In Russ.)].Wang P, Hilton E. Contribution of HLA alleles in the regulation of antibody production in Lyme disease. Front Biosci. 2001;6:10-6. doi: 10.2741/A586Wang P, Hilton E. Contribution of HLA alleles in the regulation of antibody production in Lyme disease. Front Biosci. 2001;6:10-6. doi: 10.2741/A586Crandall H, Dunn DM, Ma Y, Wooten RM. Gene expression profiling reveals unique pathways associated with differential severity of Lyme arthritis. J Immunol. 2006;177(11):7930-42. doi: 10.4049/jimmunol.177.11.7930Crandall H, Dunn DM, Ma Y, Wooten RM. Gene expression profiling reveals unique pathways associated with differential severity of Lyme arthritis. J Immunol. 2006;177(11):7930-42. doi: 10.4049/jimmunol.177.11.7930Ананьева ЛП, Барскова ВГ, Конева ЛА и др. Поражение суставов при иксодовых клещевых боррелиозах (Лаймской болезни). Вестник Российской академии медицинских наук. 2003;(7):42-7 [Anan’eva LP, Barskova VG, Koneva LA et al. The defeat of the joints with ixodid tick-borne borreliosis (Lyme disease). Vestnik Rossiiskoi akademii meditsinskikh nauk = Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences. 2003;(7):42-7 (In Russ.)].Ананьева ЛП, Барскова ВГ, Конева ЛА и др. Поражение суставов при иксодовых клещевых боррелиозах (Лаймской болезни). Вестник Российской академии медицинских наук. 2003;(7):42-7 [Anan’eva LP, Barskova VG, Koneva LA et al. The defeat of the joints with ixodid tick-borne borreliosis (Lyme disease). Vestnik Rossiiskoi akademii meditsinskikh nauk = Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences. 2003;(7):42-7 (In Russ.)].Singh SK, Girschick HJ. Lyme borreliosis: from infection to autoimmunity. Clin Microbiol Infect. 2004;10(7):598-614. doi: 10.1111/j.1469-0691.2004.00895.xSingh SK, Girschick HJ. Lyme borreliosis: from infection to autoimmunity. Clin Microbiol Infect. 2004;10(7):598-614. doi: 10.1111/j.1469-0691.2004.00895.xKlein J, Sato A. The HLA system. Second of two parts. N Engl J Med. 2000;343(11):782-6. doi: 10.1056/NEJM200009143431106Klein J, Sato A. The HLA system. Second of two parts. N Engl J Med. 2000;343(11):782-6. doi: 10.1056/NEJM200009143431106Shin JJ, Glickstein LJ, Steere AC. High levels of inflammatory chemokines and cytokines in joint fluid and synovial tissue throughout the course of antibiotic-refractory Lyme arthritis. Arthritis Rheum. 2007;56(4):1325-35. doi: 10.1002/art.22441Shin JJ, Glickstein LJ, Steere AC. High levels of inflammatory chemokines and cytokines in joint fluid and synovial tissue throughout the course of antibiotic-refractory Lyme arthritis. Arthritis Rheum. 2007;56(4):1325-35. doi: 10.1002/art.22441Drouin EE, Glickstein L, Kwok WW, Nepom GT. Human homologues of a Borrelia T cell epitope associated with antibioticrefractory Lyme arthritis. Mol Immunol. 2008;45(1):180-9. doi: 10.1016/j.molimm.2007.04.017Drouin EE, Glickstein L, Kwok WW, Nepom GT. Human homologues of a Borrelia T cell epitope associated with antibioticrefractory Lyme arthritis. Mol Immunol. 2008;45(1):180-9. doi: 10.1016/j.molimm.2007.04.017Ильинских НН, Ильинских ИН, Бочаров ЕФ. Цитогенетический гомеостаз и иммунитет. Новосибирск: Наука; 1986. C. 324 [Il’inskikh NN, Il’inskikh IN, Bocharov EF. Tsitogeneticheskii gomeostaz i immunitet [Cytogenetic homeostasis and immunity]. Novosibirsk: Nauka; 1986. P. 324].Ильинских НН, Ильинских ИН, Бочаров ЕФ. Цитогенетический гомеостаз и иммунитет. Новосибирск: Наука; 1986. C. 324 [Il’inskikh NN, Il’inskikh IN, Bocharov EF. Tsitogeneticheskii gomeostaz i immunitet [Cytogenetic homeostasis and immunity]. Novosibirsk: Nauka; 1986. P. 324].Ананьева ЛП, Насонова ВА. Клиническая характеристика суставного синдрома при иксодовых клещевых боррелиозах. В кн.: Клещевые боррелиозы: Материалы научно- практической конференции. Ижевск; 2002. C. 49-52 [Anan’eva LP, Nasonova VA. Clinical characteristics of articular syndrome with ixodid tick-borne borreliosis. In: Kleshchevye borreliozy (Tick-borne borreliosis): Proceedings of scientific conference. Izhevsk; 2002. P. 49-52].Ананьева ЛП, Насонова ВА. Клиническая характеристика суставного синдрома при иксодовых клещевых боррелиозах. В кн.: Клещевые боррелиозы: Материалы научно- практической конференции. Ижевск; 2002. C. 49-52 [Anan’eva LP, Nasonova VA. Clinical characteristics of articular syndrome with ixodid tick-borne borreliosis. In: Kleshchevye borreliozy (Tick-borne borreliosis): Proceedings of scientific conference. Izhevsk; 2002. P. 49-52].Ильинских НН. Уровень хромосомных нарушений при некоторых заболеваниях, сопровождающихся развитием аутоиммунных процессов. Клиническая медицина. 1980;(5):44-7 [Il’inskikh NN. The frequency of chromosomal abnormalities in certain diseases, accompanied by the development of autoimmune processes. Klinicheskaya Meditsina. 1980;(5):44-7 (In Russ.)].Ильинских НН. Уровень хромосомных нарушений при некоторых заболеваниях, сопровождающихся развитием аутоиммунных процессов. Клиническая медицина. 1980;(5):44-7 [Il’inskikh NN. The frequency of chromosomal abnormalities in certain diseases, accompanied by the development of autoimmune processes. Klinicheskaya Meditsina. 1980;(5):44-7 (In Russ.)].Ilyinskikh N, Ilyinskikh I, Ilyinskikh E. Infectious mutagenesis (Cytogenetic effects in human and animal cells as well as immunoreactivity induced by viruses, bacteria and helminthes). Saarbrucken: LAP LAMBERT Academic Publishen; 2012. P. 216.Ilyinskikh N, Ilyinskikh I, Ilyinskikh E. Infectious mutagenesis (Cytogenetic effects in human and animal cells as well as immunoreactivity induced by viruses, bacteria and helminthes). Saarbrucken: LAP LAMBERT Academic Publishen; 2012. P. 216.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.