rspНаучно-практическая ревматологияRheumatology Science and Practice1995-44841995-4492IMA-PRESS, LLC10.14412/1995-4484-2018-28-33rsp-2496Research ArticleОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯORIGINAL RESEARCHМолекулярно-генетическое тестирование АЦЦП-позитивных больных ревматоидным артритом с высокой воспалительной активностью заболевания (исследование РЕМАРКА)MOLECULAR GENETIC TESTING OF ACCP-POSITIVE PATIENTS WITH RHEUMATOID ARTHRITIS AND HIGH INFLAMMATORY DISEASE ACTIVITY (A REMARCA STUDY)ГусеваИ. А.GusevaI. A.

Москва.

Moscow.

irrgus@yandex.ruЛучихинаЕ. Л.LuchikhinaE. L.

Москва.

Moscow.

ДемидоваН. В.DemidovaN. V.

Москва.

Moscow.

АвдееваА. С.AvdeevaA. S.

Москва.

Moscow.

СорокаН. Е.SorokaN. E.

Москва.

Moscow.

АбрамовД. Д.AbramovD. D.

Москва.

Moscow.

ЧеркасоваМ. В.CherkasovaM. V.

Москва.

Moscow.

СамаркинаЕ. Ю.SamarkinaE. Yu.

Москва.

Moscow.

КаратеевД. Е.KarateevD. E.

Москва.

Moscow.

НасоновЕ. Л.NasonovE. L.

Москва.

Moscow.

ФГБНУ «Научно-исследовательский институт ревматологии им.В.А.Насоновой».РоссияV.A. Nasonova Research Institute of Rheumatology.Russian FederationООО «Научно-производственная фирма ДНК-Технология».РоссияOOO «Research and Production Firm DNA-Technology».Russian FederationФГБУ «Государственный научный центр Институт иммунологии» ФМБА.РоссияState Research Center Institute of Immunology, Federal Biomedical Agency of Russia.Russian FederationФГБНУ «Научно-исследовательский институт ревматологии им.В.А. Насоновой».РоссияV.A. Nasonova Research Institute of Rheumatology.Russian FederationФГБНУ «Научно-исследовательский институт ревматологии им. В.А.Насоновой».РоссияV.A. Nasonova Research Institute of Rheumatology.Russian FederationФГБНУ «Научно-исследовательский институт ревматологии им.В.А. Насоновой»; ФГАОУ ВО «Первый Московский государственный медицинский университет им.И.М.Сеченова» Минздрава России (Сеченовский университет), кафедра ревматологии Института профессионального образования.РоссияV.A. Nasonova Research Institute of Rheumatology; Department of Rheumatology, Institute of Professional Education, I.M.Sechenov First Moscow State Medical University, Ministry of Health of Russia(Sechenov University).Russian Federation2018030320185612833Copyright © Гусева И.А., Лучихина Е.Л., Демидова Н.В., Авдеева А.С., Сорока Н.Е., Абрамов Д.Д., Черкасова М.В., Самаркина Е.Ю., Каратеев Д.Е., Насонов Е.Л., 20182018Гусева И.А., Лучихина Е.Л., Демидова Н.В., Авдеева А.С., Сорока Н.Е., Абрамов Д.Д., Черкасова М.В., Самаркина Е.Ю., Каратеев Д.Е., Насонов Е.Л.Guseva I.A., Luchikhina E.L., Demidova N.V., Avdeeva A.S., Soroka N.E., Abramov D.D., Cherkasova M.V., Samarkina E.Y., Karateev D.E., Nasonov E.L.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://rsp.mediar-press.net/rsp/article/view/2496

Ревматоидный артрит (РА) является мультифакторным заболеванием, при котором взаимодействие генетической составляющей и факторов внешней среды обусловливает не только развитие болезни, но и ее выраженный клинический полиморфизм. Мы предполагаем, что высокая воспалительная активность РА может быть детерминирована генами, продукты которых инициируют иммуновоспалительные процессы.

Цель исследования заключается в изучении особенностей распределения аллелей и генотипов полиморфных вариантов генов у больных с активным, позитивным по антителам к циклическому цитруллинированному пептиду (АЦЦП) РА из программы РЕМАРКА в сравнении с контрольной группой здоровых доноров крови.

Материал и методы

Материал и методы. В молекулярно-генетическое исследование вошли 146 АЦЦП-позитивных больных из программы РЕМАРКА и контрольная группа из 314 здоровых доноров крови без аутоиммунных заболеваний и отягощенной наследственности по ним, сопоставимых по полу и возрасту с группой больных. Генотипирование полиморфных вариантов генов PTPN22 (+1858C>T, rs2476601), TNFAIP3 (rs6920220, rs10499194), CTLA4 (+49A>G, rs231775), TNFА (-308A>G, rs1800629), IL6 (-174G>C, rs1800795), IL6R (+358A>C, rs8192284), IL10 (-592A>C, rs1800872, -892 C>T, rs1800871, -1082 A>G, rs1800896), MCP1/CCL2 (+2518A>G, rs1024611) выполнено методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Результаты и обсуждение

Результаты и обсуждение. Частоты генотипов и аллелей полиморфных вариантов генов CTLA4 (+49A>G), IL6R (+358A>C), IL10 (-592A>C) в группе РА статистически значимо отличались от таковых в контрольной группе. При сравнении с контрольной группой минорные аллели генов CTLA4 и IL10 являлись маркерами риска развития АЦЦП-позитивного РА с высокой воспалительной активностью (ОШ=1,4 [1,1; 1,9], p=0,02 и ОШ=1,9 [1,4; 2,5], p=0,0001, соответственно). В то же время минорный аллель С гена IL6R служил маркером протекции (ОШ=0,7 [0,5 ;0,9], p=0,03). С использованием логистического регрессионного анализа выявлена статистически значимая взаимосвязь высокой воспалительной активности по индексам SDAI, CDAI и DAS28 c минорным гомозиготным генотипом GG гена CTLA4 [ОШ=2,5 (1,1–6,0), p=0,03, ОШ=2,6 (1,1–6,4), p=0,03 и ОШ=3,4 (1,3–8,8), p=0,01, соответственно]. Кроме того, воспалительная активность по индексам SDAI и CDAI, но не DAS28-СОЭ была ассоциирована хотя бы с одним минорным аллелем А (генотипы AA/AC) гена IL10 [ОШ=2,4 (1,2–5,1), p=0,02 и ОШ=2,2 (1,1–4,7), p=0,03, соответственно]. Уровни СОЭ и СРБ не были ассоциированы с изученными полиморфизмами.

Заключение

Заключение. Полученные данные могут свидетельствовать о взаимосвязи полиморфизмов генов CTLA4 (+49A>G, rs231775), IL6R (+358A>C, rs8192284), IL10 (-592A>C, rs1800872) с высокой воспалительной активностью в группе АЦЦП-позитивных больных из исследования РЕМАРКА. 

Rheumatoid arthritis (RA) is a multifactorial disease, in which the interaction of the genetic component and environmental factors, determines not only the development of the disease, but also its pronounced clinical polymorphism. We assume that the high inflammatory activity of RA may be determined by the genes, the products of which trigger inflammatory processes.

Objective

Objective: to investigate allele and genotype distribution of gene polymorphic variants in active anti-cyclic citrullinated peptide (aCCP)-positive patients with RA from the REMARCA program versus a control group of healthy blood donors.

Subjects and methods

Subjects and methods. A molecular genetic study enrolled 146 aCCP-positive patients from the REMARCA program and a control group of 314 healthy blood donors without autoimmune diseases and their presence in the history, who were matched with the study group for gender and sex. The polymorphic variants of the genes PTPN22 (+1858C>T, rs2476601), TNFAIP3 (rs6920220, rs10499194), CTLA4 (+49A>G, rs231775), TNFА (-308A>G, rs1800629), IL6 (-174G>C, rs1800795), IL6R (+358A>C, rs8192284), IL10 (-592A>C, rs1800872, -892 C>T, rs1800871, -1082 A>G, rs1800896), and MCP1/CCL2 (+2518A>G, rs1024611) were genotyped by a real-time polymerase chain reaction assay.

Results and discussion

Results and discussion. The genotype and allele frequencies of polymorphic variants of the genes CTLA4 (+49A>G), IL-6R (+358A>C), and IL10 (592A>C) in the RA group significantly differed from those in the control group. When comparing with the control group, the minor alleles of the CTLA4 and IL10 genes were markers for the risk of aCCP-positive RA with a high inflammatory activity (OR=1.4 [1.1; 1.9], p=0.02 and OR=1.9 [1.4; 2.5]; p=0.0001, respectively). At the same time, the minor C allele of the IL6R gene served as a marker of protection (OR=0.7 [0.5; 0.9]; p=0.03). Logistic regression analysis revealed that there was a statistically significant correlation of the high inflammatory activity indices SDAI, CDAI, and DAS28 with the minor homozygous GG genotype of the CTLA4 gene (OR=2.5 [1.1; 6.0]; p=0.03, OR=2.6 [1.1–6.4], p=0.03 and OR=3.4 [1.3–8.8]; p=0.01, respectively). In addition, the inflammatory activity indices SDAI and CDAI rather than DAS28-ESR were associated with at least one minor A allele (the AA/AC genotypes) of the IL10 gene (OR=2.4 [1.2; 5.1], p=0.02 and OR=2.2 [1.1; 4.7]; p=0.03, respectively). The levels of ESR and CRP were not associated with the examined polymorphisms.

Conclusion

Conclusion. The findings may suggest that there is a relationship of the polymorphisms of the genes CTLA4 (+49A>G, rs231775), IL6R (+358A>C, rs8192284), and IL10 (-592A>C, rs1800872) to high inflammatory activity in the group of aCCP-positive patients from the REMARCA study. 

ревматоидный артритактивность заболеванияполиморфизмы геноводнонуклеотидный полиморфизмrheumatoid arthritisdisease activitygene polymorphismssingle nucleotide polymorphismReferencesНасонов ЕЛ, Каратеев ДЕ, Балабанова РМ. Ревматоидный артрит. В кн.: Насонов ЕЛ, Насонова ВА, редакторы. Ревматология. Национальное руководство. Москва: ГЭОТАР-Медиа; 2008. С. 290-331 [Nasonov EL, Karateev DE, Balabanova RM. Rheumatoid arthritis. In: Nasonov EL, Nasonova VA, editors. Revmatologiya. Natsional'noe rukovodstvo [Rheumatology. National guidelance]. Moscow: GEOTARMedia; 2008. P. 290-331].Насонов ЕЛ, Каратеев ДЕ, Балабанова РМ. Ревматоидный артрит. В кн.: Насонов ЕЛ, Насонова ВА, редакторы. Ревматология. Национальное руководство. Москва: ГЭОТАР-Медиа; 2008. С. 290-331 [Nasonov EL, Karateev DE, Balabanova RM. Rheumatoid arthritis. In: Nasonov EL, Nasonova VA, editors. Revmatologiya. Natsional'noe rukovodstvo [Rheumatology. National guidelance]. Moscow: GEOTARMedia; 2008. P. 290-331].Van der Helm-van Mil AH, Huizinga TW. Advances in the genetics of rheumatoid arthritis point to subclassification into distinct disease subsets. Arthritis Res Ther. 2008;10(2):205. doi: 10.1186/ar2384Van der Helm-van Mil AH, Huizinga TW. Advances in the genetics of rheumatoid arthritis point to subclassification into distinct disease subsets. Arthritis Res Ther. 2008;10(2):205. doi: 10.1186/ar2384Padyukov L, Seielstad M, Ong RT, et al. A genome-wide association study suggests contrasting associations in ACPA-positive versus ACPA-negative rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 2011;70(2):259-65. doi: 10.1136/ard.2009. 126821Padyukov L, Seielstad M, Ong RT, et al. A genome-wide association study suggests contrasting associations in ACPA-positive versus ACPA-negative rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 2011;70(2):259-65. doi: 10.1136/ard.2009. 126821Гусева ИА, Демидова НВ, Сорока НЕ и др. Молекулярногенетическая характеристика раннего ревматоидного артрита. Молекулярная медицина. 2016;14(1):15-21 [Guseva IA, Demidova NV, Soroka NE, et al. Molecular-genetic characteristics of early rheumatoid arthritis. Molekulyarnaya Meditsina. 2016;14(1):15-21 (In Russ.)].Гусева ИА, Демидова НВ, Сорока НЕ и др. Молекулярногенетическая характеристика раннего ревматоидного артрита. Молекулярная медицина. 2016;14(1):15-21 [Guseva IA, Demidova NV, Soroka NE, et al. Molecular-genetic characteristics of early rheumatoid arthritis. Molekulyarnaya Meditsina. 2016;14(1):15-21 (In Russ.)].Гусева ИА, Демидова НВ, Сорока НЕ и др. Исследование полиморфизмов генов-кандидатов иммунного ответа как маркеров риска развития ревматоидного артрита и продукции аутоантител. Научно-практическая ревматология. 2016;54(1):21-30 [Guseva IA, Demidova NV, Soroka NE, et al. Investigation of candidate gene polymorphisms in an immune response as markers for the risk of developing rheumatoid arthritis and producing autoantibodies. NauchnoPrakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2016;54(1):21-30 (In Russ.)]. doi: 10.14412/1995-4484-2016-21-30Гусева ИА, Демидова НВ, Сорока НЕ и др. Исследование полиморфизмов генов-кандидатов иммунного ответа как маркеров риска развития ревматоидного артрита и продукции аутоантител. Научно-практическая ревматология. 2016;54(1):21-30 [Guseva IA, Demidova NV, Soroka NE, et al. Investigation of candidate gene polymorphisms in an immune response as markers for the risk of developing rheumatoid arthritis and producing autoantibodies. NauchnoPrakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2016;54(1):21-30 (In Russ.)]. doi: 10.14412/1995-4484-2016-21-30Кофиади ИА, Ребриков ДВ. Методы детекции однонуклеотидных полиморфизмов: аллель-специфическая ПЦР и гибридизация с олигонуклеотидной пробой. Генетика. 2006;42:22-32 [Kofiadi IA, Rebrikov DV. Detection methods for single nucleotide polymorphisms: allele-specific PCR and hybridization with oligonucleotide probe. Genetika. 2006;42:22-32 (In Russ.)].Кофиади ИА, Ребриков ДВ. Методы детекции однонуклеотидных полиморфизмов: аллель-специфическая ПЦР и гибридизация с олигонуклеотидной пробой. Генетика. 2006;42:22-32 [Kofiadi IA, Rebrikov DV. Detection methods for single nucleotide polymorphisms: allele-specific PCR and hybridization with oligonucleotide probe. Genetika. 2006;42:22-32 (In Russ.)].Seidl C, Donner H, Fischer B, et al. CTLA4 codon 17 dimorphism in patients with rheumatoid arthritis. Tissue Antigens. 1998;51(1):62-6. doi: 10.1111/j.1399-0039.1998.tb02947.xSeidl C, Donner H, Fischer B, et al. CTLA4 codon 17 dimorphism in patients with rheumatoid arthritis. Tissue Antigens. 1998;51(1):62-6. doi: 10.1111/j.1399-0039.1998.tb02947.xLigers A, Teleshova N, Masterman T, et al. CTLA-4 gene expression is influenced by promoter and exon 1 polymorphisms. Genes Immun. 2001;2:145-52. doi: 10.1038/sj.gene.6363752Ligers A, Teleshova N, Masterman T, et al. CTLA-4 gene expression is influenced by promoter and exon 1 polymorphisms. Genes Immun. 2001;2:145-52. doi: 10.1038/sj.gene.6363752Mäurer M, Loserth S, Kolb-Maurer A, et al. A polymorphism in the human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4 (CTLA4) gene (exon 1 +49) alters T cell activation. Immunogenetics. 2002;54:1-8. doi: 10.1007/s00251-002-0429-9Mäurer M, Loserth S, Kolb-Maurer A, et al. A polymorphism in the human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4 (CTLA4) gene (exon 1 +49) alters T cell activation. Immunogenetics. 2002;54:1-8. doi: 10.1007/s00251-002-0429-9Han S, Li Y, Mao Y, Xie Y. Meta-analysis of the association of CTLA-4 exon-1 +49A/G polymorphism with rheumatoid arthritis. Hum Genet. 2005;118(1):123-32. doi: 10.1007/s00439-0050033-9Han S, Li Y, Mao Y, Xie Y. Meta-analysis of the association of CTLA-4 exon-1 +49A/G polymorphism with rheumatoid arthritis. Hum Genet. 2005;118(1):123-32. doi: 10.1007/s00439-0050033-9Lee YH, Bae SC, Choi SJ, et al. Association between the CTLA-4 +49 A/G polymorphism and susceptibility to rheumatoid arthritis: a meta-analysis. Mol Biol Rep. 2012;39(5):5599-605. doi: 10.1007/s11033-011-1364-3Lee YH, Bae SC, Choi SJ, et al. Association between the CTLA-4 +49 A/G polymorphism and susceptibility to rheumatoid arthritis: a meta-analysis. Mol Biol Rep. 2012;39(5):5599-605. doi: 10.1007/s11033-011-1364-3Wang K, Zhu Q, Lu Y, et al. CTLA-4 +49 G/A Polymorphism Confers Autoimmune Disease Risk: An Updated Meta-Analysis. Genet Test Mol Biomarkers. 2017;21(4):222-7. doi: 10.1089/gtmb.2016.0335Wang K, Zhu Q, Lu Y, et al. CTLA-4 +49 G/A Polymorphism Confers Autoimmune Disease Risk: An Updated Meta-Analysis. Genet Test Mol Biomarkers. 2017;21(4):222-7. doi: 10.1089/gtmb.2016.0335Гусева ИА, Насонов ЕЛ. Генетика ревматоидного артрита. В кн.: Насонов ЕЛ, редактор. Генно-инженерные биологические препараты в лечении ревматоидного артрита. Москва: ИМА-ПРЕСС; 2013. С. 47-64 [Guseva IA, Nasonov EL. Genetics of rheumatoid arthritis. In: Nasonov EL, editor. Genno-inzhenernye biologicheskie preparaty v lechenii revmatoidnogo artrita [Genetically engineered biological agents in the treatment of rheumatoid arthritis]. Moscow: IMA-PRESS; 2013. P. 47-64].Гусева ИА, Насонов ЕЛ. Генетика ревматоидного артрита. В кн.: Насонов ЕЛ, редактор. Генно-инженерные биологические препараты в лечении ревматоидного артрита. Москва: ИМА-ПРЕСС; 2013. С. 47-64 [Guseva IA, Nasonov EL. Genetics of rheumatoid arthritis. In: Nasonov EL, editor. Genno-inzhenernye biologicheskie preparaty v lechenii revmatoidnogo artrita [Genetically engineered biological agents in the treatment of rheumatoid arthritis]. Moscow: IMA-PRESS; 2013. P. 47-64].Geng R, Song F, Yang X, et al. Association between cytotoxic T lymphocyte antigen-4 +49A/G, -1722T/C, and -1661A/G polymorphisms and cancer risk: a meta-analysis. Tumour Biol. 2014;35(4):3627-39. doi: 10.1007/s13277-013-1480-xGeng R, Song F, Yang X, et al. Association between cytotoxic T lymphocyte antigen-4 +49A/G, -1722T/C, and -1661A/G polymorphisms and cancer risk: a meta-analysis. Tumour Biol. 2014;35(4):3627-39. doi: 10.1007/s13277-013-1480-xCiccacci C, Conigliaro P, Perricone C, et al. Polymorphisms in STAT-4, IL-10, PSORS1C1, PTPN2 and MIR146A genes are associated differently with prognostic factors in Italian patients affected by rheumatoid arthritis. Clin Exp Immunol. 2016;186(2):157-63. doi: 10.1111/cei.12831Ciccacci C, Conigliaro P, Perricone C, et al. Polymorphisms in STAT-4, IL-10, PSORS1C1, PTPN2 and MIR146A genes are associated differently with prognostic factors in Italian patients affected by rheumatoid arthritis. Clin Exp Immunol. 2016;186(2):157-63. doi: 10.1111/cei.12831Paradowska-Gorycka A, Treflr J, Maciejewska-Stelmach J, Lacki JK. Interleukin-10 gene promoter polymorphism in Polish rheumatoid arthritis patients. Int J Immunogenet. 2010;37:225-31. doi: 10.1111/j.1744-313X.2010.00913.xParadowska-Gorycka A, Treflr J, Maciejewska-Stelmach J, Lacki JK. Interleukin-10 gene promoter polymorphism in Polish rheumatoid arthritis patients. Int J Immunogenet. 2010;37:225-31. doi: 10.1111/j.1744-313X.2010.00913.xYing B, Shi Y, Pan X, et al. Association of polymorphisms in the human IL-10 and IL-18 genes with rheumatoid arthritis. Mol Biol Rep. 2011;38:379-85. doi: 10.1007/s11033-010-0119-xYing B, Shi Y, Pan X, et al. Association of polymorphisms in the human IL-10 and IL-18 genes with rheumatoid arthritis. Mol Biol Rep. 2011;38:379-85. doi: 10.1007/s11033-010-0119-xГусева ИА, Панасюк ЕЮ, Сорока НЕ и др. Ассоциативная взаимосвязь генетических маркеров с эффективностью лечения ревматоидного артрита тоцилизумабом. Научно-практическая ревматология. 2013;51(4):377-82 [Guseva IA, Panasyuk EYu, Soroka NE, et al. Association of genetic markers with the efficiency of tocilizumab treatment for rheumatoid arthritis. NauchnoPrakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2013;51(4):377-82 (In Russ.)]. doi: 10.14412/1995-4484-2013-1247Гусева ИА, Панасюк ЕЮ, Сорока НЕ и др. Ассоциативная взаимосвязь генетических маркеров с эффективностью лечения ревматоидного артрита тоцилизумабом. Научно-практическая ревматология. 2013;51(4):377-82 [Guseva IA, Panasyuk EYu, Soroka NE, et al. Association of genetic markers with the efficiency of tocilizumab treatment for rheumatoid arthritis. NauchnoPrakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2013;51(4):377-82 (In Russ.)]. doi: 10.14412/1995-4484-2013-1247Guseva IA, Soroka NE, Devyataykina AY, et al. TNFAIP3 rs675520 variant may predict response to rituximab treatment in rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 2012;71 Suppl 3:669.Guseva IA, Soroka NE, Devyataykina AY, et al. TNFAIP3 rs675520 variant may predict response to rituximab treatment in rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 2012;71 Suppl 3:669.Galicia JC, Tai H, Komatsu Y, et al. Polymorphisms in the IL-6 receptor (IL-6R) gene: strong evidence that serum levels of soluble IL-6R are genetically influenced. Genes Immun. 2004;5:513-6. doi: 10.1038/sj.gene.6364120Galicia JC, Tai H, Komatsu Y, et al. Polymorphisms in the IL-6 receptor (IL-6R) gene: strong evidence that serum levels of soluble IL-6R are genetically influenced. Genes Immun. 2004;5:513-6. doi: 10.1038/sj.gene.6364120Marinou I, Walters K, Winfield J, et al. A gain of function polymorphism in the interleukin 6 receptor influences RA susceptibility. Ann Rheum Dis. 2010;69:1191-4. doi: 10.1136/ard.2008.100644Marinou I, Walters K, Winfield J, et al. A gain of function polymorphism in the interleukin 6 receptor influences RA susceptibility. Ann Rheum Dis. 2010;69:1191-4. doi: 10.1136/ard.2008.100644Rodriguez-Rodriguez L, Ramon Lamas J, Varade J, et al. Plasma soluble IL-6 receptor concentration in rheumatoid arthritis: associations with the rs8192284 IL6R polymorphism and with disease activity. Rheumatol Int. 2011;31:409-13. doi: 10.1007/s00296-0101593-0Rodriguez-Rodriguez L, Ramon Lamas J, Varade J, et al. Plasma soluble IL-6 receptor concentration in rheumatoid arthritis: associations with the rs8192284 IL6R polymorphism and with disease activity. Rheumatol Int. 2011;31:409-13. doi: 10.1007/s00296-0101593-0

The authors declare that there are no conflicts of interest present.