Генетический полиморфизм и цитогенетические изменения Т-лимфоцитов периферической крови у больных артритом, ассоциированным с иксодовым клещевым боррелиозом, в северных регионах Сибири

Ранее нами были проведены исследования, которые продемонстрировали повышенный уровень цитогенетических нарушений у больных иксодовым клещевым боррелиозом (ИКБ). Установлено также, что тяжесть клинического течения артрита, ассоциированного с ИКБ (АИКБ), зависит от наличия у больного определенных аллелей гена HLA-DRB1.

Цель настоящей работы заключалась в том, чтобы оценить связь между полиморфизмом гена HLA-DRB1 и цитогенетическими изменениями в Т-лимфоцитах периферической крови у больных АИКБ.

Материал и методы. Проведено обследование 146 больных АИКБ, 100 клинически здоровых реконвалесцентов ИКБ (РИКБ), а также контрольной группы, состоящей из 98 здоровых доноров (ЗД) крови, не болевших в прошлом клещевыми инфекциями, с применением цитогенетических (микроядерный анализ цитокинезблокированных Т-лимфоцитов периферической крови) и молекулярно-генетических (ПЦР-анализ полиморфизма гена HLA-DRB1) методов.

Результаты и обсуждение. Частота цитокинез-блокированных лимфоцитов с микроядрами у больных АИКБ была существенно выше, чем аналогичный показатель в группах РИКБ и ЗД (p<0,01), за исключением результатов, полученных в подгруппе больных АИКБ, имеющих аллель DRB1*10 (p>0,05). Наиболее высокие уровни лимфоцитов с микроядрами были у больных АИКБ с аллелью DRB1*17(03), а также *01, *04 по сравнению с соответствующими частотами в группах РИКБ и ЗД (p<0,001). В группе РИКБ наиболее значимое повышение частоты обнаружения лимфоцитов с микроядрами наблюдалось у лиц, имеющих аллели DRB1*01, DRB1*04 или *17(03). Вместе с тем нами не было выявлено никаких достоверных различий по числу лимфоцитов с микроядрами в группе ЗД в зависимости от аллелей гена HLA-DRB1 (p>0,05). Таким образом, было установлено, что больные АИКБ имели наиболее высокую частоту цитогенетических нарушений, за исключением лиц с аллелью DRB1*10.

1. Il'inskikh EN, Il'inskikh IN, Semenov AG. Cytogenetics aberrations in peripheral blood mononuclear cells in acute Lyme borreliosis patients. Cytol Genet. 2013;47(1):44-52. doi: 10.3103/S0095452713010027

2. Steere AC, Klitz W, Drouin EE, et al. Antibiotic-refractory Lyme arthritis is associated with HLA-DR molecules that bind a Borrelia burgdorferi peptide. J Exp Med. 2006;203(4):961-71. doi: 10.1084/jem.20052471

3. Kovalchuka L, Eglite J, Zalite M, et al. The frequency of HLADR alleles in patients with tick-borne disease from Latvia. Res J Infect Dis. 2014;2(4):216-22. doi: 10.7243/2052-5958-2-4

4. Усольцева ОН, Горяев ЮА, Малов ИВ. Роль Лайм-боррелиоза в структуре ревматических заболеваний в Иркутской области. Научно-практическая ревматология. 2002;40(4):130-6 [Usol'tseva ON, Goryaev YuA, Malov IV. The role of Lyme borreliosis in the structure of rheumatic diseases in the Irkutsk region. Nauchno- Prakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2002;40(4):130-6 (In Russ.)].

5. Klitz W, Maiers M, Spellman S, et al. New HLA haplotype frequency reference standards: high-resolution and large sample typing of HLA DR-DQ haplotypes in a sample of European Americans. Tissue Antigens. 2003;62(4):296-307. doi: 10.1034/j.1399-0039.2003.00103.x

6. Fenech M. The in vitro micronucleus technique. Mutation Research. 2000;455(1-2):81-95. doi: 10.1016/S0027-5107(00)00065-8

7. Ингель ФИ. Перспективы использования микроядерного теста на лимфоцитах крови человека, культивируемых в условиях цитокинетического блока. Часть I. Пролиферация клеток. Экологическая генетика. 2006;3(3):7- 19 [Ingel’ F I. Prospects for using a micronucleus test on human lymphocytes cultured under the cytokinetic block conditions. Part I. Cell proliferation. Ekologicheskaya Genetika. 2006;3(3):7-19 (In Russ.)].

8. Боровиков ВП, Боровиков ИП. Статистический анализ и обработка данных в среде Windows. Москва: Филинъ; 1997. 608 с. [Borovikov VP, Borovikov IP. Statisticheskii analiz i obrabotka dannykh v srede Windows [Statistical analysis and data processing in the Windows environment]. Moscow: Filin; 1997. 608 p.].

9. Хромова HA, Болдырева МН, Гуськова ИА и др. Изучение особенностей распределения аллелей DRB1 локуса и трехлокусных гаплотипов среди представителей восточнославянских популяций. Медицинская генетика. 2006;5(6):21-5 [Khromova HA, Boldyreva MN, Gus'kova IA, et al. A study of the distribution of the locus DRB1 alleles and triplicate haplotypes among representatives of East Slavic populations. Meditsinskaya Genetika. 2006;5(6):21-5 (In Russ.)].

10. Wang P, Hilton E. Contribution of HLA alleles in the regulation of antibody production in Lyme disease. Front Biosci. 2001;6:10-6. doi: 10.2741/A586

11. Crandall H, Dunn DM, Ma Y, Wooten RM. Gene expression profiling reveals unique pathways associated with differential severity of Lyme arthritis. J Immunol. 2006;177(11):7930-42. doi: 10.4049/jimmunol.177.11.7930

12. Ананьева ЛП, Барскова ВГ, Конева ЛА и др. Поражение суставов при иксодовых клещевых боррелиозах (Лаймской болезни). Вестник Российской академии медицинских наук. 2003;(7):42-7 [Anan’eva LP, Barskova VG, Koneva LA et al. The defeat of the joints with ixodid tick-borne borreliosis (Lyme disease). Vestnik Rossiiskoi akademii meditsinskikh nauk = Bulletin of the Russian Academy of Medical Sciences. 2003;(7):42-7 (In Russ.)].

13. Singh SK, Girschick HJ. Lyme borreliosis: from infection to autoimmunity. Clin Microbiol Infect. 2004;10(7):598-614. doi: 10.1111/j.1469-0691.2004.00895.x

14. Klein J, Sato A. The HLA system. Second of two parts. N Engl J Med. 2000;343(11):782-6. doi: 10.1056/NEJM200009143431106

15. Shin JJ, Glickstein LJ, Steere AC. High levels of inflammatory chemokines and cytokines in joint fluid and synovial tissue throughout the course of antibiotic-refractory Lyme arthritis. Arthritis Rheum. 2007;56(4):1325-35. doi: 10.1002/art.22441

16. Drouin EE, Glickstein L, Kwok WW, Nepom GT. Human homologues of a Borrelia T cell epitope associated with antibioticrefractory Lyme arthritis. Mol Immunol. 2008;45(1):180-9. doi: 10.1016/j.molimm.2007.04.017

17. Ильинских НН, Ильинских ИН, Бочаров ЕФ. Цитогенетический гомеостаз и иммунитет. Новосибирск: Наука; 1986. C. 324 [Il’inskikh NN, Il’inskikh IN, Bocharov EF. Tsitogeneticheskii gomeostaz i immunitet [Cytogenetic homeostasis and immunity]. Novosibirsk: Nauka; 1986. P. 324].

18. Ананьева ЛП, Насонова ВА. Клиническая характеристика суставного синдрома при иксодовых клещевых боррелиозах. В кн.: Клещевые боррелиозы: Материалы научно- практической конференции. Ижевск; 2002. C. 49-52 [Anan’eva LP, Nasonova VA. Clinical characteristics of articular syndrome with ixodid tick-borne borreliosis. In: Kleshchevye borreliozy (Tick-borne borreliosis): Proceedings of scientific conference. Izhevsk; 2002. P. 49-52].

19. Ильинских НН. Уровень хромосомных нарушений при некоторых заболеваниях, сопровождающихся развитием аутоиммунных процессов. Клиническая медицина. 1980;(5):44-7 [Il’inskikh NN. The frequency of chromosomal abnormalities in certain diseases, accompanied by the development of autoimmune processes. Klinicheskaya Meditsina. 1980;(5):44-7 (In Russ.)].

20. Ilyinskikh N, Ilyinskikh I, Ilyinskikh E. Infectious mutagenesis (Cytogenetic effects in human and animal cells as well as immunoreactivity induced by viruses, bacteria and helminthes). Saarbrucken: LAP LAMBERT Academic Publishen; 2012. P. 216.