Молекулярно-генетическое тестирование АЦЦП-позитивных больных ревматоидным артритом с высокой воспалительной активностью заболевания (исследование РЕМАРКА)

Ревматоидный артрит (РА) является мультифакторным заболеванием, при котором взаимодействие генетической составляющей и факторов внешней среды обусловливает не только развитие болезни, но и ее выраженный клинический полиморфизм. Мы предполагаем, что высокая воспалительная активность РА может быть детерминирована генами, продукты которых инициируют иммуновоспалительные процессы.

Цель исследования заключается в изучении особенностей распределения аллелей и генотипов полиморфных вариантов генов у больных с активным, позитивным по антителам к циклическому цитруллинированному пептиду (АЦЦП) РА из программы РЕМАРКА в сравнении с контрольной группой здоровых доноров крови.

Материал и методы. В молекулярно-генетическое исследование вошли 146 АЦЦП-позитивных больных из программы РЕМАРКА и контрольная группа из 314 здоровых доноров крови без аутоиммунных заболеваний и отягощенной наследственности по ним, сопоставимых по полу и возрасту с группой больных. Генотипирование полиморфных вариантов генов PTPN22 (+1858C>T, rs2476601), TNFAIP3 (rs6920220, rs10499194), CTLA4 (+49A>G, rs231775), TNFА (-308A>G, rs1800629), IL6 (-174G>C, rs1800795), IL6R (+358A>C, rs8192284), IL10 (-592A>C, rs1800872, -892 C>T, rs1800871, -1082 A>G, rs1800896), MCP1/CCL2 (+2518A>G, rs1024611) выполнено методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени.

Результаты и обсуждение. Частоты генотипов и аллелей полиморфных вариантов генов CTLA4 (+49A>G), IL6R (+358A>C), IL10 (-592A>C) в группе РА статистически значимо отличались от таковых в контрольной группе. При сравнении с контрольной группой минорные аллели генов CTLA4 и IL10 являлись маркерами риска развития АЦЦП-позитивного РА с высокой воспалительной активностью (ОШ=1,4 [1,1; 1,9], p=0,02 и ОШ=1,9 [1,4; 2,5], p=0,0001, соответственно). В то же время минорный аллель С гена IL6R служил маркером протекции (ОШ=0,7 [0,5 ;0,9], p=0,03). С использованием логистического регрессионного анализа выявлена статистически значимая взаимосвязь высокой воспалительной активности по индексам SDAI, CDAI и DAS28 c минорным гомозиготным генотипом GG гена CTLA4 [ОШ=2,5 (1,1–6,0), p=0,03, ОШ=2,6 (1,1–6,4), p=0,03 и ОШ=3,4 (1,3–8,8), p=0,01, соответственно]. Кроме того, воспалительная активность по индексам SDAI и CDAI, но не DAS28-СОЭ была ассоциирована хотя бы с одним минорным аллелем А (генотипы AA/AC) гена IL10 [ОШ=2,4 (1,2–5,1), p=0,02 и ОШ=2,2 (1,1–4,7), p=0,03, соответственно]. Уровни СОЭ и СРБ не были ассоциированы с изученными полиморфизмами.

Заключение. Полученные данные могут свидетельствовать о взаимосвязи полиморфизмов генов CTLA4 (+49A>G, rs231775), IL6R (+358A>C, rs8192284), IL10 (-592A>C, rs1800872) с высокой воспалительной активностью в группе АЦЦП-позитивных больных из исследования РЕМАРКА. 

1. Насонов ЕЛ, Каратеев ДЕ, Балабанова РМ. Ревматоидный артрит. В кн.: Насонов ЕЛ, Насонова ВА, редакторы. Ревматология. Национальное руководство. Москва: ГЭОТАР-Медиа; 2008. С. 290-331 [Nasonov EL, Karateev DE, Balabanova RM. Rheumatoid arthritis. In: Nasonov EL, Nasonova VA, editors. Revmatologiya. Natsional'noe rukovodstvo [Rheumatology. National guidelance]. Moscow: GEOTARMedia; 2008. P. 290-331].

2. Van der Helm-van Mil AH, Huizinga TW. Advances in the genetics of rheumatoid arthritis point to subclassification into distinct disease subsets. Arthritis Res Ther. 2008;10(2):205. doi: 10.1186/ar2384

3. Padyukov L, Seielstad M, Ong RT, et al. A genome-wide association study suggests contrasting associations in ACPA-positive versus ACPA-negative rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 2011;70(2):259-65. doi: 10.1136/ard.2009. 126821

4. Гусева ИА, Демидова НВ, Сорока НЕ и др. Молекулярногенетическая характеристика раннего ревматоидного артрита. Молекулярная медицина. 2016;14(1):15-21 [Guseva IA, Demidova NV, Soroka NE, et al. Molecular-genetic characteristics of early rheumatoid arthritis. Molekulyarnaya Meditsina. 2016;14(1):15-21 (In Russ.)].

5. Гусева ИА, Демидова НВ, Сорока НЕ и др. Исследование полиморфизмов генов-кандидатов иммунного ответа как маркеров риска развития ревматоидного артрита и продукции аутоантител. Научно-практическая ревматология. 2016;54(1):21-30 [Guseva IA, Demidova NV, Soroka NE, et al. Investigation of candidate gene polymorphisms in an immune response as markers for the risk of developing rheumatoid arthritis and producing autoantibodies. NauchnoPrakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2016;54(1):21-30 (In Russ.)]. doi: 10.14412/1995-4484-2016-21-30

6. Кофиади ИА, Ребриков ДВ. Методы детекции однонуклеотидных полиморфизмов: аллель-специфическая ПЦР и гибридизация с олигонуклеотидной пробой. Генетика. 2006;42:22-32 [Kofiadi IA, Rebrikov DV. Detection methods for single nucleotide polymorphisms: allele-specific PCR and hybridization with oligonucleotide probe. Genetika. 2006;42:22-32 (In Russ.)].

7. Seidl C, Donner H, Fischer B, et al. CTLA4 codon 17 dimorphism in patients with rheumatoid arthritis. Tissue Antigens. 1998;51(1):62-6. doi: 10.1111/j.1399-0039.1998.tb02947.x

8. Ligers A, Teleshova N, Masterman T, et al. CTLA-4 gene expression is influenced by promoter and exon 1 polymorphisms. Genes Immun. 2001;2:145-52. doi: 10.1038/sj.gene.6363752

9. Mäurer M, Loserth S, Kolb-Maurer A, et al. A polymorphism in the human cytotoxic T-lymphocyte antigen 4 (CTLA4) gene (exon 1 +49) alters T cell activation. Immunogenetics. 2002;54:1-8. doi: 10.1007/s00251-002-0429-9

10. Han S, Li Y, Mao Y, Xie Y. Meta-analysis of the association of CTLA-4 exon-1 +49A/G polymorphism with rheumatoid arthritis. Hum Genet. 2005;118(1):123-32. doi: 10.1007/s00439-0050033-9

11. Lee YH, Bae SC, Choi SJ, et al. Association between the CTLA-4 +49 A/G polymorphism and susceptibility to rheumatoid arthritis: a meta-analysis. Mol Biol Rep. 2012;39(5):5599-605. doi: 10.1007/s11033-011-1364-3

12. Wang K, Zhu Q, Lu Y, et al. CTLA-4 +49 G/A Polymorphism Confers Autoimmune Disease Risk: An Updated Meta-Analysis. Genet Test Mol Biomarkers. 2017;21(4):222-7. doi: 10.1089/gtmb.2016.0335

13. Гусева ИА, Насонов ЕЛ. Генетика ревматоидного артрита. В кн.: Насонов ЕЛ, редактор. Генно-инженерные биологические препараты в лечении ревматоидного артрита. Москва: ИМА-ПРЕСС; 2013. С. 47-64 [Guseva IA, Nasonov EL. Genetics of rheumatoid arthritis. In: Nasonov EL, editor. Genno-inzhenernye biologicheskie preparaty v lechenii revmatoidnogo artrita [Genetically engineered biological agents in the treatment of rheumatoid arthritis]. Moscow: IMA-PRESS; 2013. P. 47-64].

14. Geng R, Song F, Yang X, et al. Association between cytotoxic T lymphocyte antigen-4 +49A/G, -1722T/C, and -1661A/G polymorphisms and cancer risk: a meta-analysis. Tumour Biol. 2014;35(4):3627-39. doi: 10.1007/s13277-013-1480-x

15. Ciccacci C, Conigliaro P, Perricone C, et al. Polymorphisms in STAT-4, IL-10, PSORS1C1, PTPN2 and MIR146A genes are associated differently with prognostic factors in Italian patients affected by rheumatoid arthritis. Clin Exp Immunol. 2016;186(2):157-63. doi: 10.1111/cei.12831

16. Paradowska-Gorycka A, Treflr J, Maciejewska-Stelmach J, Lacki JK. Interleukin-10 gene promoter polymorphism in Polish rheumatoid arthritis patients. Int J Immunogenet. 2010;37:225-31. doi: 10.1111/j.1744-313X.2010.00913.x

17. Ying B, Shi Y, Pan X, et al. Association of polymorphisms in the human IL-10 and IL-18 genes with rheumatoid arthritis. Mol Biol Rep. 2011;38:379-85. doi: 10.1007/s11033-010-0119-x

18. Гусева ИА, Панасюк ЕЮ, Сорока НЕ и др. Ассоциативная взаимосвязь генетических маркеров с эффективностью лечения ревматоидного артрита тоцилизумабом. Научно-практическая ревматология. 2013;51(4):377-82 [Guseva IA, Panasyuk EYu, Soroka NE, et al. Association of genetic markers with the efficiency of tocilizumab treatment for rheumatoid arthritis. NauchnoPrakticheskaya Revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2013;51(4):377-82 (In Russ.)]. doi: 10.14412/1995-4484-2013-1247

19. Guseva IA, Soroka NE, Devyataykina AY, et al. TNFAIP3 rs675520 variant may predict response to rituximab treatment in rheumatoid arthritis. Ann Rheum Dis. 2012;71 Suppl 3:669.

20. Galicia JC, Tai H, Komatsu Y, et al. Polymorphisms in the IL-6 receptor (IL-6R) gene: strong evidence that serum levels of soluble IL-6R are genetically influenced. Genes Immun. 2004;5:513-6. doi: 10.1038/sj.gene.6364120

21. Marinou I, Walters K, Winfield J, et al. A gain of function polymorphism in the interleukin 6 receptor influences RA susceptibility. Ann Rheum Dis. 2010;69:1191-4. doi: 10.1136/ard.2008.100644

22. Rodriguez-Rodriguez L, Ramon Lamas J, Varade J, et al. Plasma soluble IL-6 receptor concentration in rheumatoid arthritis: associations with the rs8192284 IL6R polymorphism and with disease activity. Rheumatol Int. 2011;31:409-13. doi: 10.1007/s00296-0101593-0