Сравнение диагностической информативности определения мРНК некоторых гомеостатических и провоспалительных цитокинов в синовиальной оболочке больных ревматоидным артритом

Проблема ранней диагностики ревматоидного артрита (РА) сохраняет свою актуальность, что связано с ограниченным потенциалом доступных биомаркеров и гетерогенностью заболевания. Хемокины и цитокины, продуцируемые синовиальной оболочкой больных, играют ведущую роль в патогенезе заболевания, что предполагает возможность их использования в качестве перспективных биомаркеров.

Цель исследования – сравнительное изучение относительной экспрессии мРНК гомеостатических хемокинов: фактора, продуцируемого стромальными клетками 1 (CXCL12/ФПСК1), хемоаттрактанта В-клеток (CXCL13/ХБК1), их рецепторов CХCR4 и CХCR5, провоспалительных хемокинов: макрофагального хемотаксического белка 1 (CCL2/МХБ1), хемокина, экспрессируемого и секретируемого T-клетками при активации (CCL5/RANTES), интерлейкина (ИЛ) 8 (CXCL8/ИЛ8), ИЛ17 и сосудисто-эндотелиального фактора роста (СЭФР) в биоптатах синовиальной оболочки больных РА, остеоартрозом (ОА) и здоровых лиц, оценка диагностической информативности данных биомаркеров.

Материал и методы. Экспрессию мРНК оценивали методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени. Группа РА включала 28 больных, медиана возраста – 47 [35; 54] лет, длительности заболевания – 8 [4; 12] лет, значение индекса DAS28 – 4,9 [3,9; 5,5], 16 больных были серопозитивны по ревматоидному фактору, 14 – по антителам к циклическому цитруллинированному пептиду. В группу ОА вошли 22 пациента с медианой возраста 70,5 [61; 74] года. Обследованы также 15 клинически здоровых лиц с медианой возраста 45 [28; 64] лет.

Результаты и обсуждение. У больных РА отмечалось значимое повышение уровней мРНК RANTES, ИЛ8 и ИЛ17, СЭФР, ХБК1 и CXCR5 в сравнении с группами больных ОА и здоровых лиц. У больных ОА уровень гомеостатических хемокинов ХБК1 и ФПСК1, обладающих В-клеточной хемоаттрактивной активностью, значимо превысил таковой в контрольной группе, что может указывать на их участие в патогенезе заболевания. Наиболее информативным в диагностике РА оказалось определение мРНК RANTES: площадь под кривой (ППК) – 0,91 [95% доверительный интервал (ДИ) 0,84–0,99], диагностическая чувствительность – 72,97% (95% ДИ 55,88–86,21%), диагностическая специфичность – 96,15% (95% ДИ 80,36–99,90%), отношение правдоподобия положительного результата (ОППР) – 18,95, отношение правдоподобия отрицательного результата (ОПОР) – 0,28 при диагностическом пороге 0,0350, а также мРНК ХБК1. Значение ППК ХБК1 составило 0,78 (95% ДИ 0,66–0,89), диагностическая чувствительность – 56,25% (95% ДИ 37,66–73,64%), диагностическая специфичность – 92,59% (95% ДИ 75,71–99,09%), ОППР – 7,59, ОПОР – 0,47 при диагностическом пороге 0,0184.

1. Каратеев ДЕ, Александрова ЕН, Демидова ИВ и др. Антицитруллиновые антитела и данные магнитно-резонансной томографии суставов кисти у больных ранним артритом. Терапевтический архив. 2008;80(10):72-6 [Karateev DE, Aleksandrova EN, Demidova IV, et al. Anticitrullin antibodies and data of magnetic resonance imaging of hand joints in patients with early arthritis. Terapevticheskii arkhiv. 2008;80(10):72-6 (In Russ.)].

2. Жебрун ДА, Тотолян АА, Маслянский АЛ и др. Синтез ангиогенных и ангиостатических СXС-хемокинов и их рецепторов в синовиальной оболочке при ревматоидном артрите. Цитокины и воспаление. 2014;13(2):39-44 [Zhebrun DA, Totolyan AA, Maslyanskii AL, et al. Synthesis of endogenous angiostatic and CXC chemokines and their receptors in synovium in rheumatoid arthritis. Tsitokiny i vospalenie. 2014;13(2):39-44 (In Russ.)].

3. Altman R, Asch E, Bloch D, et al. Development of criteria for the classification and reporting of osteoarthritis. Classification of osteoarthritis of the knee. Diagnostic and Therapeutic Criteria Committee of the American Rheumatism Association. Arthritis Rheum. 1986;29(8):1039-49. doi: 10.1002/art.1780290816

4. Жебрун ДА, Маслянский АЛ, Титов АГ и др. Определение мРНК ангиогенных и ангиостатических хемокинов и их рецепторов в синовиальной оболочке методом количественной ПЦР в реальном времени. Медицинская иммунология. 2013;15(6):525-34 [Zhebrun DA, Maslyanskii AL, Titov AG, et al. Determination of mRNA of angiogenic and angiostatic chemokines and their receptors in the synovium by quantitative real-time PCR. Meditsinskaya immunologiya. 2013;15(6):525-34 (In Russ.)]. doi: /10.15789/1563-0625-2013-6-525-534

5. Corsiero E, Bombardieri M, Manzo A, et al. Role of lymphoid chemokines in the development of functional ectopic lymphoid structures in rheumatic autoimmune diseases. Immunol Lett. 2012;145(1-2):62-7. doi: 10.1016/j.imlet.2012.04.013

6. Kokebie R, Aggarwal R, Lidder S, et al. The role of synovial fluid markers of catabolism and anabolism in osteoarthritis, rheumatoid arthritis and asymptomatic organ donors. Arthritis Res Ther. 2011;13(2):R50. doi: 10.1186/ar3293

7. Маслянский АЛ, Лапин СВ, Мазинг АВ и др. Диагностическая значимость серологических маркеров ревматоидного артрита. Научно-практическая ревматология. 2012;50(5):20-4 [Maslaynski AL, Lapin SV, Mazing AV, et al. Diagnostic value of serological markers of rheumatoid arthritis. Nauchno-prakticheskaya revmatologiya = Rheumatology Science and Practice. 2012;50(5):20-4 (In Russ.)]. doi: 10.14412/1995-4484-2012-1175

8. Маслянский АЛ, Мазуров ВИ, Зоткин ЕГ и др. Анти-В-клеточная терапия аутоиммунных заболеваний. Медицинская иммунология. 2007;9(1):15-34 [Masliansky AL, Mazurov VI, Zotkin EG, et al. Anti-B-cell therapy of autoimmune diseases. Meditsinskaya immunologiya = Medical Immunology. 2007;9(1):15-34 (In Russ.)]. doi: 10.15789/1563-0625-2007-1-15-34

9. Humby F, Bombardieri M, Manzo A, et al. Ectopic lymphoid structures support ongoing production of class-switched autoantibodies in rheumatoid synovium. PLoS Med. 2009;6(1):e1. doi: 10.1371/journal.pmed.0060001

10. Bugatti S, Manzo A, Vitolo B, et al. High expression levels of the B cell chemoattractant CXCL13 in rheumatoid synovium are a marker of severe disease. Rheumatology (Oxford). 2014;53(10):1886-95. doi: 10.1093/rheumatology/keu163

11. Grassi F, Cristino S, Toneguzzi S, et al. CXCL12 chemokine upregulates bone resorption and MMP-9 release by human osteoclasts: CXCL12 levels are increased in synovial and bone tissue of rheumatoid arthritis patients. J Cell Physiol. 2004;199(2):244-51. doi: 10.1002/jcp.10445

12. Hansen IB, Ellingsen T, Hornung N, et al. Plasma level of CXC-chemokine CXCL12 is increased in rheumatoid arthritis and is independent of disease activity and methotrexate treatment. J Rheumatol. 2006;33(9):1754-9.

13. Loeuille D, Chary-Valckenaere I, Champigneulle J, et al. Macroscopic and microscopic features of synovial membrane inflammation in the osteoarthritic knee: correlating magnetic resonance imaging findings with disease severity. Arthritis Rheum. 2005;52(11):3492-501. doi: 10.1002/art.21373

14. Chen B, Deng Y, Tan Y, et al. Association between severity of knee osteoarthritis and serum and synovial fluid interleukin 17 concentrations. J Int Med Res. 2014;42(1):138-44. doi: 10.1177/0300060513501751

15. Hampel U, Sesselmann S, Iserovich P, et al. Chemokine and cytokine levels in osteoarthritis and rheumatoid arthritis synovial fluid. J Immunol Methods. 2013;396(1-2):134-9. doi: 10.1016/j.jim.2013.08.007

16. Borzi RM, Mazzetti I, Macor S, et al. Flow cytometric analysis of intracellular chemokines in chondrocytes in vivo: constitutive expression and enhancement in osteoarthritis and rheumatoid arthritis. FEBS Lett. 1999;455(3):238-42. doi: 10.1016/S0014-5793(99)00886-8

17. Kanbe K, Takagishi K, Chen Q. Stimulation of matrix metalloprotease 3 release from human chondrocytes by the interaction of stromal cell-derived factor 1 and CXC chemokine receptor 4. Arthritis Rheum. 2002;46(1):130-7. doi: 10.1002/1529-0131(200201)46:1<130::AID-ART10020>3.0.CO;2-D

18. Lisignoli G, Cristino S, Toneguzzi S, et al. IL1beta and TNFalpha differently modulate CXCL13 chemokine in stromal cells and osteoblasts isolated from osteoarthritis patients: evidence of changes associated to cell maturation. Exp Gerontol. 2004;39(4):659-65. doi: 10.1016/j.exger.2003.09.030

19. Lee SS, Joo YS, Kim WU, et al. Vascular endothelial growth factor levels in the serum and synovial fluid of patients with rheumatoid arthritis. Clin Exp Rheumatol. 2001;19(3):321-4.

20. Haywood L, McWilliams DF, Pearson CI, et al. Inflammation and angiogenesis in osteoarthritis. Arthritis Rheum. 2003;48(8):2173-7. doi: 10.1002/art.11094